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細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟：
1．將冷凍管迅速由液氮轉(zhuǎn)入到37℃水浴中，冷凍管的頂部保持在水面以上以避免任何污染，不定時(shí)攪拌加速解凍；
2．當(dāng)細(xì)胞*解凍后，用含70%乙醇的紗布擦拭冷凍管消毒；
3．將解凍后細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含4℃預(yù)平衡培養(yǎng)液的試管中；
4．細(xì)胞懸液在4℃下200磄離心10分鐘；
5．棄上清，將細(xì)胞重新懸浮在新鮮培養(yǎng)液中；
6．將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到細(xì)胞培養(yǎng)瓶，CO2孵箱中培養(yǎng)；
7．是用倒置顯微鏡檢查細(xì)胞存活率以及細(xì)胞密度，如果細(xì)胞密度過(guò)高，用培養(yǎng)液稀釋至適宜濃度。

培養(yǎng)條件：
*培養(yǎng)基：DMEM高糖培養(yǎng)基90%；胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide（CO2）,5%

傳代方法：
收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。